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GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細胞分離

更新時間:2025-05-29      點擊次數(shù):119

GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細胞分離

在生命科學(xué)研究領(lǐng)域,對細胞進行高效、高純度的分離是眾多實驗的關(guān)鍵起始步驟。GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS(貨號 17144002)作為一款備受認(rèn)可的細胞分離介質(zhì),在淋巴細胞分離等實驗中發(fā)揮著重要作用,為科研人員提供了可靠的技術(shù)支持。

產(chǎn)品概述

FICOLL PAQUE PLUS 是一種無菌的即用型密度梯度介質(zhì) ,專為從人外周血中分離淋巴細胞而精心設(shè)計,在全球?qū)嶒炇抑幸殉蔀轶w外研究的標(biāo)準(zhǔn)選擇。它能助力科研人員獲取高產(chǎn)率、高純度的淋巴細胞,滿足多種科研實驗對細胞樣本的嚴(yán)格要求。該產(chǎn)品的包裝規(guī)格有多種,如常見的 6×100 mL 裝,方便不同規(guī)模實驗的需求。

核心技術(shù)原理

  1. 密度梯度離心原理:血液中各類細胞的密度存在差異 ,紅細胞和多核白細胞比重較大,約為 1.092,而淋巴細胞和單個核細胞比重相對較小,在 1.075 左右。FICOLL PAQUE PLUS 的密度精準(zhǔn)控制在 1.077±0.001 g/mL,這一密度恰好介于紅細胞和淋巴細胞之間。當(dāng)含有多種細胞的血液樣本與 FICOLL PAQUE PLUS 混合后進行離心時,不同細胞會依據(jù)自身密度在離心力的作用下,在分離液中形成不同的層次,從而實現(xiàn)細胞的分離。

  1. 成分協(xié)同作用:其主要成分包括 9.0% (w/v) 的泛影葡胺鈉、5.7% (w/v) 的 Ficoll PM400 以及 0.0231%(w/v) 的依地酸鈣鈉 。泛影葡胺鈉可增加溶液的密度,有助于形成穩(wěn)定的密度梯度;Ficoll PM400 作為一種高分子量蔗糖聚合物,能促進紅細胞的凝集,使得紅細胞在離心過程中更容易沉淀,從而與淋巴細胞更好地分離;依地酸鈣鈉則起到抗凝作用,防止血液樣本在分離過程中發(fā)生凝固,保證細胞的完整性和活性。

產(chǎn)品性能優(yōu)勢

  1. 高純度與高回收率:使用 FICOLL PAQUE PLUS 分離淋巴細胞,所得單核細胞含量可達 95 ±5% ,淋巴細胞得率為 60 ± 20%。這意味著科研人員能夠從外周血樣本中獲取到高純度的淋巴細胞,且細胞的回收率較高,為后續(xù)實驗提供了充足且優(yōu)質(zhì)的細胞材料。無論是進行淋巴細胞功能研究,還是基于淋巴細胞的細胞治療探索等,高純度和高回收率的淋巴細胞樣本都至關(guān)重要,能有效減少雜質(zhì)細胞對實驗結(jié)果的干擾,提高實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。

  1. 良好的細胞活力維持:該產(chǎn)品在分離過程中能很好地維持淋巴細胞的活力 ,細胞存活率可達 95 ±5%。這得益于其溫和的分離條件以及對細胞無明顯毒性的成分。高活力的淋巴細胞對于需要細胞繼續(xù)進行培養(yǎng)、增殖或功能檢測的實驗尤為關(guān)鍵,如淋巴細胞的體外刺激實驗、細胞因子分泌檢測等,只有保持細胞的高活力,才能真實反映淋巴細胞在生理狀態(tài)下的功能和特性。

  1. 低內(nèi)毒素水平:FICOLL PAQUE PLUS 的內(nèi)毒素水平極低,小于 0.12 EU/mL 。內(nèi)毒素的存在可能會對細胞產(chǎn)生毒性作用,影響細胞的正常生理功能,進而干擾實驗結(jié)果。低內(nèi)毒素水平保證了分離得到的淋巴細胞不受內(nèi)毒素的污染和干擾,對于一些對內(nèi)毒素敏感的實驗,如細胞培養(yǎng)、免疫細胞功能研究等,能夠提供更純凈、可靠的細胞樣本,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  1. 操作簡便快速:基于 Boyum 發(fā)展的方法,使用 FICOLL PAQUE PLUS 進行淋巴細胞分離僅需簡單快速的離心操作 。科研人員只需將適量的血液樣本小心鋪加在 FICOLL PAQUE PLUS 分離液上方,然后放入離心機中,按照推薦的離心條件進行離心,即可實現(xiàn)細胞的分層分離。整個操作過程無需復(fù)雜的設(shè)備和繁瑣的步驟,即使是實驗新手也能快速上手,大大提高了實驗效率,節(jié)省了科研時間。

與其他淋巴細胞分離方法的對比

對比維度
FICOLL PAQUE PLUS
紅細胞裂解液法
流式細胞分選法
磁珠分選法
分離純度
單核細胞含量 95 ±5%
純度較低,易殘留雜質(zhì)
純度高,但可能存在損失
純度較高,特異性強
細胞活力
存活率 95 ±5%
對細胞有一定損傷
操作復(fù)雜,影響活力
可能影響細胞功能
操作難度
簡單,僅需離心
步驟相對復(fù)雜
需專業(yè)設(shè)備與技術(shù)
需特定設(shè)備與操作
分離時間
較短
中等
較長
中等
成本
適中
較低
設(shè)備昂貴,成本高
磁珠成本較高
適用場景
常規(guī)實驗
對純度要求不高的實驗
高純度特殊需求實驗
特定細胞亞群分離

1. 與紅細胞裂解液法對比

紅細胞裂解液法通過化學(xué)試劑裂解紅細胞,從而實現(xiàn)淋巴細胞的分離 。然而,這種方法容易導(dǎo)致細胞碎片殘留,分離得到的淋巴細胞純度較低,難以滿足對細胞純度要求較高的實驗。同時,裂解液對淋巴細胞也可能產(chǎn)生一定的損傷,影響細胞活力。相比之下,F(xiàn)ICOLL PAQUE PLUS 利用密度梯度離心原理,能有效避免細胞碎片殘留問題,且對細胞的損傷極小,在分離純度和細胞活力方面具有明顯優(yōu)勢。

2. 與流式細胞分選法對比

流式細胞分選法可根據(jù)細胞的物理和化學(xué)特性對淋巴細胞進行精準(zhǔn)分選,純度 。但該方法需要專業(yè)的流式細胞儀設(shè)備,操作過程復(fù)雜,對操作人員的技術(shù)要求較高,且分選過程可能會對細胞造成一定的機械損傷,影響細胞活力。此外,設(shè)備和試劑成本高昂,限制了其在常規(guī)實驗室中的廣泛應(yīng)用。FICOLL PAQUE PLUS 操作簡便,無需復(fù)雜設(shè)備,且能較好地維持細胞活力,對于大多數(shù)常規(guī)科研實驗而言,是更經(jīng)濟、高效的選擇。

3. 與磁珠分選法對比

磁珠分選法利用磁珠與特定細胞表面標(biāo)志物的特異性結(jié)合,通過磁場作用分離淋巴細胞,可實現(xiàn)對特定細胞亞群的高效分離 。不過,磁珠與細胞的結(jié)合可能會影響細胞的功能,且磁珠成本較高。而 FICOLL PAQUE PLUS 無需依賴細胞表面標(biāo)志物,能分離獲得多種淋巴細胞亞群的混合樣本,適用于對淋巴細胞整體研究的實驗,且成本相對較低,操作更簡便。

應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 免疫學(xué)研究:在免疫學(xué)研究中,淋巴細胞是核心研究對象 。FICOLL PAQUE PLUS 分離得到的高純度、高活力淋巴細胞,可用于研究淋巴細胞的免疫應(yīng)答機制,如 T 細胞和 B 細胞的活化、增殖、分化過程,以及它們在免疫防御、免疫調(diào)節(jié)中的作用。通過對淋巴細胞的深入研究,有助于揭示免疫系統(tǒng)的工作原理,為開發(fā)新型免疫治療方法、疫苗等提供理論基礎(chǔ)。例如,在腫瘤免疫治療研究中,分離出的淋巴細胞可用于體外擴增和修飾,使其具備更強的抗腫瘤活性,再回輸?shù)交颊唧w內(nèi),以達到治療腫瘤的目的。

  1. 傳染病研究:在傳染病研究領(lǐng)域,淋巴細胞在機體對抗病原體感染的過程中發(fā)揮著重要作用 。利用 FICOLL PAQUE PLUS 分離患者外周血中的淋巴細胞,可用于研究淋巴細胞對病原體的免疫反應(yīng),包括淋巴細胞分泌細胞因子的類型和水平、淋巴細胞對病原體的殺傷能力等。這有助于深入了解傳染病的發(fā)病機制,為開發(fā)針對性的治療藥物和疫苗提供關(guān)鍵線索。例如,在艾滋病研究中,通過對 HIV 感染者淋巴細胞的研究,可探索 HIV 病毒如何感染淋巴細胞以及淋巴細胞如何抵抗病毒感染,為尋找有效的艾滋病治療方法提供方向。

  1. 血液學(xué)研究:在血液學(xué)研究中,淋巴細胞的數(shù)量和功能變化與多種血液疾病密切相關(guān) 。FICOLL PAQUE PLUS 可用于從患者血液樣本中分離淋巴細胞,用于分析淋巴細胞在白血病、淋巴瘤等血液腫瘤中的異常表現(xiàn),如細胞形態(tài)、免疫表型、基因表達等方面的變化。通過對這些異常的研究,有助于血液疾病的診斷、分型和預(yù)后評估,同時也為開發(fā)新的治療策略提供依據(jù)。例如,在白血病的診斷和治療監(jiān)測中,準(zhǔn)確分離和分析淋巴細胞的變化,對于判斷病情進展和治療效果具有重要意義。

產(chǎn)品使用說明

  1. 樣本準(zhǔn)備:使用 FICOLL PAQUE PLUS 時,建議使用新鮮采集的人外周血樣本 。采血過程應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作原則,使用無熱原、無內(nèi)毒素的采血器材。采集后的血液樣本若不能立即進行分離,可在室溫下短暫保存,但不宜超過數(shù)小時,以免影響細胞活性和分離效果。若需長時間保存,可采用適當(dāng)?shù)目鼓齽┨幚砗?,在低溫下保存,但?yīng)注意保存條件對細胞的影響。

  1. 實驗操作流程:操作時,先將 FICOLL PAQUE PLUS 分離液小心轉(zhuǎn)移至離心管中,注意不要產(chǎn)生氣泡 。然后用移液器將稀釋后的血液樣本緩慢鋪加在分離液上方,形成清晰的界面。血液與分離液的體積比推薦為 2:3 。將離心管放入離心機中,按照推薦的離心條件(如室溫下,以特定轉(zhuǎn)速離心一定時間,具體參數(shù)可參考產(chǎn)品說明書)進行離心。離心結(jié)束后,可觀察到明顯的細胞分層,位于分離液界面上的白膜層即為富含淋巴細胞的單個核細胞層。使用移液器小心吸取該層細胞,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,再通過適當(dāng)?shù)南礈觳襟E去除殘留的分離液和雜質(zhì),即可獲得相對純凈的淋巴細胞。

  1. 存儲條件:為保證 FICOLL PAQUE PLUS 的性能,應(yīng)將其存儲于 4 - 30℃的環(huán)境中 。避免陽光直射和高溫環(huán)境,防止產(chǎn)品變質(zhì)。在使用過程中,要注意產(chǎn)品的有效期,盡量在有效期內(nèi)使用,以確保實驗結(jié)果的可靠性。開封后的產(chǎn)品應(yīng)盡快使用,并妥善保存剩余部分,防止微生物污染。若發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品出現(xiàn)渾濁、沉淀或顏色異常等情況,請勿使用。

GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS 憑借其先進的技術(shù)原理、性能表現(xiàn)、廣泛的應(yīng)用范圍以及相較于其他方法的顯著優(yōu)勢,成為科研人員在淋巴細胞分離領(lǐng)域的得力工具 。無論是基礎(chǔ)科研探索,還是臨床應(yīng)用研究,它都能為科研工作提供高質(zhì)量的淋巴細胞樣本,助力科研人員在生命科學(xué)領(lǐng)域不斷取得新的突破。但需注意,本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于臨床診斷或治療。在使用過程中,若遇到任何問題,可隨時聯(lián)系 GE Life 專業(yè)的技術(shù)支持團隊獲取幫助。


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